Jungfru Marie nycklar växer öppet på frisk, mager och kalkfattigare mark än skogsnycklar D. maculata subsp. fuchsii. Den är funnen i kanten av björkdominerad blandskog, i kalkfattiga skogskärr, utmed diken, på betade strandängar och mindre kalkpåverkad alvarmark. Jungfru Marie nycklar uppträder mest som enstaka plantor på lokalerna.

Jungfru Marie nycklar är sparsamt förekommande på Öland och mest funnen längst i söder vid Ottenby, Ås sn. För övrigt finns spridda fynd med viss preferens för Mittlandet. Underarten kan vara förbisedd men en viss minskning konstateras ändå jämfört med Sterner (1986). Orsaken bedöms vara att magra, fuktiga marker har tillåtits växa igen under de senaste decennierna men även den eutrofiering som skett av landskapet har missgynnat orkidén. Dessutom spelade säkert Åke Lundqvists orkidéintresse in i att han lyckades notera underarten i fler socknar. Jämfört med Sterner (1986) ses en minskning i statistiska analyser (Frescalo och Telfer).

Gammal, bofast.

Se även fläcknycklar Dactylorhiza maculata