Ursprunglig.
Tvåblad förekommer i de mest skilda biotoper, i ängen, fuktängar, skuggiga skogar och även på kulturpåverkad mark som trädgårdar (gräsmattor och rabatter), vägkanter, dikeskanter m.m. Den blir högvuxen och mångblommig på frisk, näringsrik mark och står gärna i lätt skugga intill buskar och träd. Tvåblad är en av de vanligaste orkidéerna på Gotland; bara skogsknipprot Epipactis helleborine har en högre närvaro i provrutorna.