Rosettjungfrulin är flerårig med blad-rosetter som övervintrar gröna. Arten är ljuskrävande och växer helst öppet och aldrig i skog. Den förekommer bara i låg vegetation och behöver inslag av grus eller annan naken mineraljord för att föryngras. Rosettjungfrulin är en av de pålitligaste signalarterna för kalk. Den fordrar förhållandevis hög kalkhalt (hög-re än vildlin) och enbart basiska grönstenar räcker sällan. Arten förekommer både i torra och fuktiga biotoper. Den är en karaktärsart för kalkfuktängar som utvecklas på flacka kalkrika stränder, i myrkanter och i kraftledningsgator eller annan varaktigt öppen, växelfuktig mark. Den naturliga biotopen är troligen fuktängssamhällen och kalkgrusmarker i anslutning till havsstranden. Rosettjungfrulinet växer också i torrängsbackar på kalkgrus och i många kulturskapade miljöer som banvallar, grusvägar, industritomter och grustag. Arten gynnas av bete, slåtter och visst slitage. Den kan ibland utveckla massförekomster på kalkrika skogsvägar.

Artens utbredning på lokal och nationell nivå speglar förekomster av större kalktrakter.
Sällsynt (11% och 113 noterade lokaler).